lang=zh data-reactroot=headmeta charSet=utf-8me na=viewport contenwidth=device-width initial-scale=1title da-rct-hel=true[求助]电泳条带的含量如何确定? - 丁香园论坛
发布时间:2024-05-03 15:50:21 浏览:
实验室条件所限,不能测定DNA含量。看文献上说可以根据电泳时Marker的亮度来判断,如果比Marker亮,说明是克数比Marker大,还是摩尔数比Marker大?亮一倍是不是就是大一倍?
1.DNA Marker说明书上都有指出其在一定上样量的情况下每一条带大致的含量,比如说takara的DL200的DNA Marker,它在上样量是5ul的情况下每一条带的DNA量是50ng,每一种DNA Marker都有其特定的说明,请根据具体使用的DNA Marker进行判断。你可以通过对比目的条带和DNA Marker条带的灰度来进行目的DNA量的估计,因此通常用来进行目的DNA的半定量。在得到你的目的DNA定量后再除去你的上样量就可以知道你的DNA的浓度。在琼脂糖电泳中使用EB染色的方法的检测下限是10ng,因此当你的目的片段浓度很低时要通过增加上样量来进行条带的观察。
2.如果比Marker亮,说明是克数比Marker大,不是摩尔数比Marker大。相同质量的的DNA在琼脂糖电泳中的亮度是一样的,但是由于他们的分子量有很大的差别,因此他们的分子个数就有很大的差别,也就是摩尔数很大的差别。
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